随着肿瘤诊疗精准化以及诊断技术的发展，NGS基因检测已经成为炙手可热的检测技术。但是对于血液病患友及家属来说，疾病诊疗过程中关于NGS检测的作用、时机、意义仍存在很多困惑。本期中，心方向患儿家长代表响妈邀请到高博诊断中心分子诊断实验室郑勤龙主任和北京高博博仁医院血液一科林跃辉医生，共同解答患友及家属关于NGS基因检测的相关困惑，帮助大家更好地理解NGS基因检测在血液病诊疗中的重要意义。

1、什么是NGS基因检测？它在血液肿瘤患者诊疗中的作用如何？

郑勤龙主任：NGS基因检测（Next-generation sequencing）称为二代测序，是一种基因测序技术，常用于血液病患者的诊疗。那么为什么要做NGS检测呢？我们知道，血液肿瘤实际上在微观水平，也就是基因层面上有一些非常微小的变异，但这些微小变异是具有致病性的，对肿瘤的发生、预后、药物治疗的反应有着决定性的影响。

而随着二代测序技术的进步，NGS检测可以一次性、大通量地在众多基因中检测出这些异常基因变异信息，为临床提供更准确的诊疗信息，对临床的诊断分型、预后判断、治疗方案的选择、靶向药物的选择、治疗反应的预测以及微小残留的监测都有重要的指导作用。

2、肿瘤患者应该在患病的哪个阶段进行NGS检测？NGS检测的准确性如何？

郑勤龙主任：目前国内外指南中都把NGS检测放在疾病初诊阶段，就是在做完骨髓形态、流式检测以后，还需要进行NGS检测。在临床上这一系列检测又称整合诊断，可以使疾病临床诊断更加准确，帮助医生第一时间掌握肿瘤特定的基因变异类型，更好地判断疾病分型、预后以及治疗方案的选择，从而精准地针对患者特定的肿瘤特征进行个性化治疗，让患者在治疗过程中少走弯路。

3、使用靶向药物之前，必须做 NGS检测吗？

郑勤龙主任：靶向药物顾名思义需要有确定的靶点，才能够进行精准的打击。而要想做到精准的靶向治疗，就需要先通过NGS检测到特定的基因异常，再针对性地使用靶向药物，效果才会更好、更精准。所以精准治疗的前提就是做NGS检测，找到特定的基因异常，并选定针对这些特定基因异常的靶向药物进行治疗。有的放矢，这是精准治疗的精髓。

4、NGS检测前患者需要注意什么？

郑勤龙主任：NGS检测主要是检查患者肿瘤细胞中基因变异的情况，所以要求患者最好在没有接受治疗之前，也就是怀疑患有血液肿瘤或者已经诊断为血液肿瘤，但还没有接受治疗的情况下进行检测。治疗后肿瘤细胞会有一些变化，甚至有一些基因谱已经发生了变化，这时再去检测的结果就不能全面反映肿瘤初诊时的基因变异了。

此外，如果患者初诊时检测到血象异常，而流式或者细胞形态检测到肿瘤细胞<20%，这种情况是不能确诊的。但如果NGS基因检测出来有明确异常，那就可以确诊。

所以我们强调，第一，送检的样本不管是骨髓还是外周血，要确保有肿瘤细胞，否则就查不出来，可能会得到一个假阴性的结果；第二，尽量使用治疗前的样本检测，这样能保持肿瘤细胞最原始的基因变异状态，从而更精准地给出治疗方案。

5、血液肿瘤患者骨穿时要做很多检测，包括形态、流式、分子检测，是否每次骨穿都需要把这些检测做一遍？

郑勤龙主任：很多患者可能不太理解，为什么要做这么多检测。其实形态、染色体、流式检测和分子检测每种方法都有其检测的内容、范围及意义，也都有局限性。比如染色体是检测基因结构方面的异常，而NGS检测更多关注基因层面一些微小且关键的致病性位点的变异。所以，并不是说只用一种检测方法就能把其他检测方法都替代，做这些检测也是有相应的目的。

第一个目的，整合诊断的结果会更准确。形态、流式、染色体与分子检测之间是互相配合的关系，通过整合所有的检测结果，才能更清晰地了解肿瘤的特征，更准确地诊断疾病，诊断出错的可能性就比较小。如果单独用形态检测，大概3%~8%的患者可能会被误诊或错误分型，但是如果有分子或者流式检测结果的整合，就可以帮助纠正单独一种技术和方法在诊断当中的误区，这样诊断结果就比较准确。

第二个目的，流式和分子检测可以对残留缓解深度进行监测。大量的研究已经证明，形态学上的缓解往往是不够的，一定要达到流式或者分子水平的缓解，疾病复发的风险才会降低。残留检测主要是基于第一次检测出来的肿瘤，在第二次的骨穿中检测异常肿瘤细胞是否还存在，如果不存在了，就证明达到了深度缓解，患者的复发率就会降低。此外，分子与流式检测是互相补充的，有一些患者治疗中会发生肿瘤的逃逸或者免疫表型变化，这时如果还用原来的流式方法检测，可能肿瘤细胞已经变异了，最终会得到一个假阴性的结果。所以一定是分子、流式两种检测方法结合起来，这样可以提高到20%~30%的检出力。

第三个目的，流式和分子定量检测可以反应肿瘤细胞对治疗方案的灵敏性，指导治疗方案的调整。分子和流式都可以使用定量的方法监测残留，如果前期治疗中残留下降比较快，就证明治疗方案效果较好，也就是肿瘤细胞对医生选择的治疗方案反应较好，医生就可以继续维持原来的方案，直至把所有的肿瘤细胞都清除掉；如果治疗中残留下降很慢，这时可能怀疑肿瘤已经产生耐药，医生会采取加强治疗，或者调整治疗方案，再配合一些其他的治疗。

6、患儿父母准备要二胎，需不需要做基因检测？如果需要做，具体要做哪些呢？

郑勤龙主任：如果家族当中有部分成员有肿瘤，尤其是直系的、有血缘关系的这种亲属患有肿瘤，或患者已检出有明确的遗传性血液肿瘤基因异常，可以考虑做一下检测。

如果检测出来的结果是阴性的，或者只是一些易感基因的异常，而不是遗传性的血液肿瘤基因异常，患儿父母不必过度担心。实际上有很多人，包括有免疫缺陷的人，都会有易感基因的存在，但并不代表有易感基因就会遗传给孩子，所以这方面不需要过分的担心。如果患儿父母为了优生优育，可以做一些相关的生育遗传咨询，查一下是否有明确的基因变异。

7、患者男，30岁，急性B淋巴细胞白血病2年多（P190伴T315I突变）。有过中枢神经系统白血病，做了腰穿及鞘内注射。目前处于化疗阶段。这个基因突变对疾病恢复影响有多大？后面要怎么治疗？有没有可以入组的临床试验？

林跃辉医生：正常来说，患者现阶段继续化疗基本上没有太大的效果，建议患者可以考虑选择其他的免疫治疗方法，比如CAR-T和抗体治疗，当然对于中枢白血病，肯定CAR-T效果最好。BCR::ABL阳性的急淋有一些TKI类药物靶向药，效果还是不错的。

关于这个基因对疾病恢复影响有多大，在以前没有免疫治疗或没有TKI和奥雷巴替尼等靶向药出现之前，BCR::ABL阳性的急淋是属于绝对高危的疾病类型，但是近几年由于免疫治疗和靶向药的不断进步，患者的疗效是非常好的，所以这一类疾病目前的预后还是比较可观的。

至于后面要怎么治疗，建议患者可以了解一下CAR-T或者抗体，鉴于患者有中枢神经系统的问题，可以先了解一下CAR-T疗法。CAR-T对髓外白血病包括中枢问题的疗效是比较好的。目前CAR-T的临床试验还是挺多的，但具体需要根据患者详细的病情资料，包括骨髓情况、中枢情况、髓外或者有没有感染等情况，再做进一步具体的分析。

■ 本文专家介绍

郑勤龙主任

高博诊断中心分子诊断实验室主任；

整合诊断专家组专家；

北京医学会临床检验医学分会，第十三届委员；

美国癌症研究学会会员；

上海医科大学医学学士，美国俄克拉荷马大学(The University of Oklahoma)健康医学中心博士后。

具有30多年癌症等疾病的实验室检测与研究经验，包括风险评估、早期诊断、预后、药物筛选、药效监测等。

先后在美国俄克拉荷马大学健康医学中心、美国洛杉矶加州大学临床病理和检验医学系、美国国立癌症研究所(NCI)、北欧生物科技(北京)有限公司、北欧国际生化病理研究中心(北京)公司工作。

从事血液科工作10余年。

林跃辉医生

1. 主要从事白血病的化疗及免疫治疗，从事CART细胞治疗多年，熟悉CART细胞治疗风险的处理，并熟知各种免疫治疗的异同及其相互之间的桥接等等治疗方案的调整，以及免疫治疗、化疗与移植之间的桥接工作等。

2. 进入临床工作之前，学习过血液病相关的特殊检验技术，擅长各种常见血液系统疾病的诊断及治疗，熟知血液系统疾病各种特殊检查，有丰富的血液病的鉴别诊断经验。